> Iroyin > Awọn iroyin ile-iṣẹ

Kini idi ti aṣa sẹẹli ṣe lyse awọn sẹẹli ẹjẹ pupa ni akọkọ?

2022-12-23

Ipilẹ ifihan
Erythrocyte lysate jẹ ọkan ninu awọn ọna ti o rọrun julọ ati rọrun lati yọ awọn sẹẹli ẹjẹ pupa kuro, eyini ni, lati pin awọn sẹẹli ẹjẹ pupa pẹlu lysate, eyi ti ko ba awọn sẹẹli ti o ni iparun jẹ ati pe o le yọ awọn sẹẹli ẹjẹ pupa kuro ni kikun. Lisate cleavage jẹ ọna yiyọ sẹẹli ẹjẹ pupa kekere kan, eyiti a lo ni akọkọ fun ipinya ati isọdi awọn sẹẹli ti ara ti o tuka nipasẹ tito nkan lẹsẹsẹ enzymu, ipinya ati isọdi mimọ ti awọn lymphocytes, ati yiyọ awọn sẹẹli ẹjẹ pupa kuro ninu awọn adanwo ti amuaradagba ti ara ati iparun. isediwon acid. Awọn sẹẹli ara ti o gba nipasẹ lysate ti awọn sẹẹli ẹjẹ pupa ko ni awọn sẹẹli ẹjẹ pupa, ati pe o le ṣee lo siwaju fun aṣa akọkọ, idapọ sẹẹli, cytometry ṣiṣan, ipinya ati isediwon ti nucleic acid ati amuaradagba, ati bẹbẹ lọ.

Awọn ilana fun lilo
Ayẹwo sẹẹli tissue
1. Awọn ara tuntun ti wa ni digested nipasẹ pancreas / enzyme tabi collagenase ti a si tuka sinu idaduro sẹẹli kan, ati pe a ti sọ supernatant kuro nipasẹ centrifugation.

2. Mu ELS lysate lati inu firiji ni 4â, fi ELS lysate kun si cell precipitate ni ipin kan ti 1: 3-5 (fi 3-5ml ti lysate si 1ml ti cell compacted), rọra fẹ ati ki o dapọ.

3. Centrifuge ni 800-1000rpm fun awọn iṣẹju 5-8 ki o sọ omi pupa ti o ga julọ silẹ.

4. Apakan ti o ṣaju ni a gba ati fifojudi pẹlu ojutu Hank tabi ojutu aṣa ti ko ni omi ara fun awọn akoko 2-3.

5, ti bibu ko ba pari/pari le tun ṣe awọn igbesẹ 2 ati 3.

6. Awọn sẹẹli ifasilẹyin fun awọn idanwo ti o tẹle; Ti RNA ba fa jade, o dara julọ lati ṣe bẹ ni ojutu ti a pese sile lati Igbesẹ 4 nipa lilo omi DEPC

Awọn sẹẹli ẹjẹ pupa ni igbesi aye igbesi aye kukuru pupọ, awọn ọjọ 120 nikan, ṣugbọn wọn ṣe ẹda ẹjẹ ni iyara, ati pe ninu ọran yii wọn ni agbara pataki ti pipin sẹẹli, ati pe wọn jẹ awọn sẹẹli ti o yara ju gbogbo wọn pin, nitorinaa sẹẹli yii niyelori pupọ. nitorina o wulo pupọ fun aṣa sẹẹli. O rọrun pupọ, ko ni awọn ara-ara ninu rẹ, o kan awọn membran sẹẹli ati awọn ọlọjẹ.

Ti tẹlẹ:Kini awọn iṣẹ ti ohun elo ELISA?

Itele:Awọn ibeere Reagent ati aṣoju ipilẹ ti ifọkansi ojutu.